調(diào)節(jié)腸道菌群功能的動物試驗評價方法

1 測試項目
推薦使用近交系小鼠作為實驗動物，18-22g，單一性別，每組10-15只。實驗中設3個劑量組和1個隱形對照組，必要時設陽性對照組。測試樣品給藥 14 天，必要時可延長至 30 天。供試品前，無菌取小鼠糞便0.1g，連續(xù)稀釋10倍，選擇合適的稀釋度接種各培養(yǎng)基。反應等菌落的鑒定和計數(shù)，計算出每克濕糞便中的細菌數(shù)，取對數(shù)進行統(tǒng)計處理。最后一次給藥后24小時，同實驗前一樣收集直腸糞便，檢測腸道菌群。檢測指標：體重、雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌。

2 實驗原理
2.1 動物實驗和人體食品試驗所列指標為強制性項目。
2.2 選擇正常動物或腸道菌群紊亂模型動物之一。
2.3 當供試樣品含有除雙歧桿菌和乳酸桿菌以外的益生菌時，應對益生菌進行動物和人體實驗。

3 動物試驗結果的判斷
符合下列任何一項的，可判定供試品調(diào)節(jié)腸道菌群功能的動物試驗結果為陽性。
3.1 雙歧桿菌和/或乳桿菌（或其他益生菌）顯著增加，梭狀芽孢桿菌減少或無明顯變化，腸球菌、腸桿菌、類桿菌無明顯變化。
3.2 雙歧桿菌和/或乳桿菌（或其他益生菌）顯著增加，梭狀芽孢桿菌減少或無明顯變化，腸球菌和/或腸桿菌顯著增加，但增幅低于雙歧桿菌和乳桿菌（或其他益生菌）的增加。